求助，加尾法檢測miRNA引物如何設計？MiRNA引物設計（干環(huán)染色法）設計方法：在干環(huán)后端有6個堿基對MiRNA的反向互補序列為逆轉錄引物，正向引物為去除6個堿基對MiRNA的序列，反向引物位于干環(huán)

求助，加尾法檢測miRNA引物如何設計？

MiRNA引物設計（干環(huán)染色法）設計方法：在干環(huán)后端有6個堿基對MiRNA的反向互補序列為逆轉錄引物，正向引物為去除6個堿基對MiRNA的序列，反向引物位于干環(huán)上。逆轉錄干環(huán)通用序列：gtcgtccaggtgcgtcgtggaggtgcaattgcactggatacgacmirna序列：>mmu-mir-99b-5pmimat Mus musculus mir-99b-5pcacccguaccgaccguugcgmmu-mir-99b-5p逆轉錄頸環(huán)引物：gtcgtccagtgaggtccaattgcactggatacgaccaag定量PCR逆轉錄引物：tgtcggagagagacgc底漆：CACCGTAGAACCGAC